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    酶聯(lián)免疫試劑盒在實驗過程中遇到的各種疑問!
    更新時間:2017-03-31   點擊次數(shù):1153次

    大家在做ELISA試劑盒進口大鼠實驗的時候,難免會遇到不同的問題,比如標(biāo)準曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽性,實驗的重復(fù)性不好等等。現(xiàn)在我們就來一一解答用戶朋友們在實驗過程中遇到的各種疑問!
    曲線問題: 
     
    1.OD值不正常:試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃
                                溫度控制不好,控制正確溫度
                               孵育時間不準確,控制孵育時間
                              洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干
                            陽光直射,對著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避光
                            酶標(biāo)儀的波長錯誤,酶標(biāo)儀的波長450nm
                           抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體
                            水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替
     
    2.白   板:洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液
                 少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體
               
     
    3.無 梯 度:標(biāo)準品也污染,換標(biāo)準品點板
                         OD值不正常,控制溫度時間在做一次
                        人為點板,不要點板/
    4.線 性 不 好:OD值不正常,控制溫度時間在做一次
                             
    ELISA試劑盒進口大鼠回收率:
    1.空白管陽性高:樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
                                 空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染
                               水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替
     
    2.偏  高:添加量不準確,的添加量
              添加濃度不適合,添加合適的濃度
               取液吹干量多,準確的取液吹干
               取到其它相層液體,取需用相吹干
               復(fù)溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復(fù)溶液
     
    3.偏  低:添加量不準確,的添加量
              添加濃度不適合,添加合適的濃度
              取液吹干量少,準確的取液吹干
               復(fù)溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復(fù)溶液
    假陰、陽性:

    1,水質(zhì)原因:點復(fù)溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替
    2,實驗操作原因: 吸取到其它相吹干,準確的取液吹干
                      離心不*,延長離心時間
                      樣本的污染,更換樣本
                      乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現(xiàn)象
    3,儀器試劑原因:離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具
                      有機溶劑的影響,做試劑空白看影響結(jié)果
    4,衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑
    5,與曲線好壞相關(guān),,ELISA試劑盒進口大鼠保證曲線的正常
     

     

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